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菌落計(jì)數(shù)在使用時(shí)應(yīng)該防止出現(xiàn)哪些問(wèn)題
更新時(shí)間:2021-10-23  |  點(diǎn)擊率:2505
  菌落是指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長(zhǎng)物,它是由數(shù)以萬(wàn)計(jì)相同的細(xì)菌集合而成。當(dāng)樣品被稀釋到一定程度,與培養(yǎng)基混合,在一定培養(yǎng)條件下,每個(gè)能夠生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌細(xì)胞都可以在平板上形成一個(gè)可見(jiàn)的菌落。
  菌落總數(shù)就是指在一定條件下(如需氧情況、營(yíng)養(yǎng)條件、pH、培養(yǎng)溫度和時(shí)間等)每克(每毫升)檢樣所生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)菌菌落總數(shù)。按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定,即在需氧情況下,37℃培養(yǎng)48h,能在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落總數(shù),所以厭氧或微需氧菌、有特殊營(yíng)養(yǎng)要求的以及非嗜中溫的細(xì)菌,由于現(xiàn)有條件不能滿(mǎn)足其生理需求,故難以繁殖生長(zhǎng)。因此菌落總數(shù)并不表示實(shí)際中的所有細(xì)菌總數(shù),菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類(lèi),所以有時(shí)被稱(chēng)為雜菌數(shù),需氧菌數(shù)等。
  菌落計(jì)數(shù)的注意事項(xiàng)
  1、到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間,應(yīng)立即計(jì)數(shù)。如果不能立即計(jì)數(shù),應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得超過(guò)24h。
  2、計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)在30-300 CFU之間的平板,若有二個(gè)稀釋度均在30-300 CFU之間時(shí),按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報(bào)告)。
  3、若所有稀釋度均不在計(jì)數(shù)區(qū)間。如均大于300 CFU,則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如均小于30 CFU,則以至低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如菌落數(shù)有的大于300 CFU,有的又小于30 CFU,但均不在30-300 CFU之間,則應(yīng)以接近300 CFU或30 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則應(yīng)按小于1乘以至低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。有的規(guī)定對(duì)上述幾種情況計(jì)算出的菌落數(shù)按估算值報(bào)告。
  4、不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個(gè)平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,則應(yīng)視為檢驗(yàn)中的差錯(cuò)(有的食品有時(shí)可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應(yīng)作為檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)。
  5、當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí),如呈鏈狀生長(zhǎng)的菌落之間無(wú)任何明顯界限,則應(yīng)作為一個(gè)菌落計(jì),如存在有幾條不同來(lái)源的鏈,則每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算,不要把鏈上生長(zhǎng)的每一個(gè)菌落分開(kāi)計(jì)數(shù)。如有片狀菌落生長(zhǎng),該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
  6、當(dāng)計(jì)數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過(guò)多(即所有稀釋度均大于300 CFU時(shí)),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計(jì)數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
  7、菌落數(shù)的報(bào)告,按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1-100時(shí),按實(shí)有數(shù)字報(bào)告,如大于100時(shí),則報(bào)告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計(jì)算。固體檢樣以克(g)為單位報(bào)告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報(bào)告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報(bào)告。
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